经验直达：
- 医院怎么检查肠道菌群
- 肠道菌群检测是什么
- 如何检测大肠杆菌
一、医院怎么检查肠道菌群
肠道菌群有两种检查方法 。(一)菌群检查为主要检查方法，有定性分析和定量分析两种 。(1)定性分析，与一般微生物检查方法相同，定性分析后，要进一步做定量检查 。(2)定量检查，手续麻烦，一般实验室很少采用 。(二)结肠镜检查：有散在的糜烂性溃疡及出血，有时可能会见黄色假膜附着 。如果症状严重者建议去医院诊断及治疗 。
肠道内种类繁多的细菌之间相互作用以维持肠道正常菌群的稳定性 。肠道中需氧菌和兼性厌氧菌消耗氧气，有利于专性厌氧菌生长 。专性厌氧菌过度繁殖反过来抑制需氧菌生长，进一步抑制厌氧菌自身繁殖 。这些细菌还通过各种代谢产物互相影响 ， 起到自身调节作用 。有些学者将胃肠道菌群分为原籍菌（或称常住菌群或固定菌群）和外籍菌（或称过路菌群或游动菌群），正常菌群是以原籍菌为优势菌群，外籍菌参与组成，外籍菌在人体中数量少而且不稳定 。当肠道内一些原籍菌由于失去制约而过度生长叫肠道菌群失调 。
二、肠道菌群检测是什么
肠道菌群检测是通过对人体粪便的提取物检测肠道菌群状况，比例是否正常，存在哪些问题和风险 。对于前述适应症疑似患者，治疗前均需进行肠道菌群进行多项常规生物指标检测，以初步判断患者肠道菌群状况 。
肠道菌群检测
肠道菌群基因检测指从粪便样本中提取细菌DNA，通过高通量测序分析将DNA序列拼接功能序列对比，还原所检测的样本中微生物基因的组成，能够更加准确地预测样本中所有微生物共同构建的功能网络和互作关系，并将其与现有健康肠道菌群数据库进行对比，以此为依据生成检测报告 。
报告描述受检者肠道微生物结构及多样性，尤其是肠道功能核心菌群的含量及构比 ， 监测肠道中的益生菌、条件致病菌以及致病菌，预测相关疾病发生风险 ， 为亚健康状态及疾病的诊断、干预提供有力数据支撑 。
在进行此基础上，进一步对疑似患者进行肠道菌群基因检测，并对结果进行详尽解读，以便给患者菌群移植治疗制定个性化精准菌群移植治疗方案 。
三、如何检测大肠杆菌
【医院怎么检查肠道菌群-肠道菌群检测是什么】大肠菌群测定的操作细则(***研究所测试中心)
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌 。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能 。
食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示 。
1 设备和材料
1.1 温箱：36±1℃ 。
1.2 冰箱:0～4℃ 。
1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃ 。
1.4 天平 。
1.5 显微镜 。
1.6 均质器或乳钵 。
1.7 平皿:直径为90mm 。
1.8 试管 。
1.9 吸管 。
1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL 。
1.11 玻璃珠:直径约5mm 。
1.12 载玻片 。
1.13 酒精灯 。
1.14 试管架 。
2 培养基和试剂
2.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定 。
2.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定 。
2.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定 。
2.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定 。
2.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定 。
2.6 生理盐水 。
2.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定 。
3 操作步骤
3.1 检样稀释
3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液 。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液 。
3.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液 。
3.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管 。
3.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管 。
3.2 乳糖发酵试验
将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管 。每一稀释度接种3管,置36±1℃ 温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行 。
3.3 分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验 。
3.4 证实试验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况 。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性 。
3.5 报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值 。
4 粪大肠菌群(faecal coliform)
4.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见3.2条)转种于EC肉汤管内,置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置 培养18-24h,凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性 。
4.2 结果报告
根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值 。